(抗击新冠肺炎)揭秘“手撕病毒”P3实验室

　　中新社广州3月10日电 题：揭秘“手撕病毒”P3实验室

　　作者 蔡敏婕 陈淑华

　　病毒学检测是战“疫”链条的关键环节，在这场新冠肺炎战“疫”中，阳性病例的确诊主要依靠实验室检测。

　　“这里是与病毒‘零距离’接触的地方，整个实验室完全密封，室内处于负压状态，人流、物流、气流单向流动，确保在里面的污染物不会泄漏到外面而造成污染。”广东省第二人民医院P3实验室主任林剑国10日接受采访时说，“这里”指的是P3实验室，该院每天400多份新冠肺炎核酸检测就是在这里开展的。实验员24小时不间断地利用分子生物学技术手段检测病毒。

　　P3实验室是生物安全防护三级实验室，根据微生物及其毒素的危害程度不同，分为四级。其中，三级适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物或其毒素。

　　核酸检测是确诊新冠肺炎的“金标准”，而检测流程中的每一个环节都是精细活。在操作中，实验员面对眼前的样本，需要“一个一个地揭开盖子，开盖加样和核酸提取”。

　　林剑国称，实验室内的检测流程可分为5个步骤。首先，采集的检测样本如咽拭子或肛拭子，在进入P3实验室前就得先进入一个特殊的窗口，这个传递窗有不能同时打开的双重门，保证传递样本时带进去的空气被隔离在双重门中，不污染实验室外环境。

　　样本在水浴箱经半个小时56摄氏度高温灭活，这样会使病毒蛋白不再有生理活性，失去感染、致病和繁殖能力。

　　据广东省第二人民医院检验医学部副主任技师胡亮杉介绍，在标本处理间，实验员拿到灭活后的样本时，第一个动作就是振荡，接下来是开盖加样。

　　“样本在开盖转移的过程中，病毒非常容易暴露在实验室的空气中，与我们几乎是零距离接触。”胡亮杉说。

　　人工核酸提取的步骤更是复杂。“核酸提取可以使用仪器辅助，但由于比对的需要，往往要加以人工操作，这需要反复进行离心、加试剂、洗涤等10多个步骤。”胡亮杉说。

　　提取的核酸送到核酸检测室内，就要上仪器了。提取的核酸加入到扩增试剂中，通过荧光PCR仪进行RT-PCR反应，先将提取的核酸逆转录成DNA，再以DNA为模版，对特定位点进行扩增，利用不同的温度进行变性、退火和延伸，每个循环采集荧光值，45个循环后绘制荧光曲线，用时约110分钟，实验员根据荧光曲线分析判断结果的阴性和阳性。

　　林剑国称，任何一个环节出现问题都可能导致“假阴性”或“假阳性”。在检测过程中，针对可疑样本，实验员选用不同的试剂进行复核确定；其次，每进行一批实验，均会随机插入三个以上空白对照，针对阳性样本会进行病毒基因的测序比对，以防止“假阳性”的出现。检测后，定期随机抽取检测后的样本送第三方实验室进行检测，对数据进行对比分析，同时也参加相关部门的室间质评，保障检测的准确性。

　　林剑国介绍，P3检测团队目前有21人，70%以上是硕士以上学历，均经过分子生物学的培训和拥有PCR上岗证。

　　“他们与战斗在病房里的医护人员不同，他们藏在实验室里，每天与病毒近距离接触，是别人看不见的‘最前线’。”林剑国说。(完)